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      Fisher細胞爬片的組織取材與制作方法

      發布時間: 2018-08-06  點擊次數: 407次
      Fisher細胞爬片組織取材
      1、腦組織和神經組織應采用灌注固定后,再進行后固定。
      2、組織取材注意事項:
      (1)標本新鮮:組織要求離體后30min~2h內浸入固定液,尤其是開展分子生物學工作。動物組織取材要求心臟還在跳動時取材。
      (2)注意防止人為因素的影響刀和剪要快,避免擠壓。
      (3)組織塊的大小 厚為0.1~0.3cm,大小可根據需要而定。

      Fisher細胞爬片的制作方法
      1.爬片可用一般的蓋玻片,也可用爬片。
      2.應用蓋玻片,可根據自己的需要剪裁成合適的大小,以備置于6孔板、12孔板或24孔板;裁剪時可用前護士輸液用于打開玻璃安瓶的小沙輪,或者是口腔科的那種小沙輪,輕輕劃一下后,稍用力一掰就分開了。如果接種大皿的話,一般不將蓋玻片切開,直接清潔后放入培養皿中,到染色時再將之切開,這樣既保證了細胞均一性,又可同時做幾個指標的染色。
      3.將剪裁好的爬片,置于濃硫酸中浸泡并過夜,第二天先用自來水沖洗20遍,再置于無水酒清中浸泡6小時,再用三蒸水沖洗3遍,放在飯盒或者玻璃培養皿中烘干后進行高壓消毒。
      4.高壓后取出放入烤箱中烤干,備用??靖珊罂煞湃氤瑑襞_中。
      5.關于多聚賴氨酸,很多人都將玻片用此處理,以使細胞與玻片結合更牢。但我在做爬片時從來沒用過多聚賴氨酸,細胞貼壁仍然很好,且在做后續的免疫細胞化學染色、tunel等凋亡檢測、免疫熒光等也從未脫過片。
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